2. 1. 3. generalidades de los medios de cultivo

Es una solución químicamente definida que se utiliza para reproducir tejidos vegetales Este es el proceso por el cual se trae material vegetal in vivo en un medio de cultivo estéril. Requiere la disección microscópica de la  planta bajo condiciones estrictamente higiénicas con el propósito de transferir su punto de crecimiento o tejido que crece activamente (los tejidos meristemáticos) con seguridad y limpieza dentro de un recipiente estéril sin introducir microorganismos contaminantes. Las células y tejidos que crecerán y se desarrollarán desde este inicio dependerán de los objetivos del cultivo de tejidos. En algunos casos las células conformarán una masa aparentemente desorganizada, conocida como callo, en otros estarán presentes otras estructuras reconocibles como tallos, órganos, raíces, bulbos u otros órganos.

Con el propósito de sostener el vigor de los tejidos vegetales y permitir que ellos crezcan, se multipliquen y desarrollen, esto es cultivar los tejidos, deben darse además ciertos requerimientos externos. Los tejidos pueden necesitar que se los apoye  o sean colocados sobre o en el interior de la superficie de un gel acuoso solidificado con agar o ellos pueden colocarse en un medio líquido. Ellos también necesitarán de un suministro de los elementos  minerales nutritivos que son esenciales para el crecimiento vegetal, también posiblemente algunas vitaminas, azúcares como fuente de energía y hormonas vegetales que controlan el crecimiento y desarrollo de estos tejidos particulares. Es conveniente preparar este medio ambiente nutricional incorporando estos compuestos químicos dentro del gel o líquido, ajustando el pH alrededor de 6 y esterilizando este medio de cultivo ya sea dentro del recipiente para cultivo o en uno separado.

Para el correcto crecimiento y desarrollo del  tejido en cultivo en general es necesario el suministro de luz, pero a intensidades muy bajas, mucho más que la de la luz solar. La acumulación en las plantas de la energía de los carbohidratos provendrá de los azúcares agregados al medio, más que de la fotosíntesis, de manera que son innecesarios unos altos niveles de luz. 

Una temperatura controlada también es necesaria para estabilizar el crecimiento y mejorar la predictibilidad del desarrollo de los tejidos.

2.1 Medios de cultivo

2. 1. 1. Áreas del laboratorio de cultivo de tejidos.

ÁREA DE PREPARACION DE MEDIOS: se utiliza principalmente para preparan los medios de cultivo, debe contener un espacio para contener los materiales de vidrio, plástico y también los reactivos químicos, también debe contener mesas para preparar los medios de cultivo.

ÁREA DE LAVADO Y DE ESTERILIZACIÓN:

·         Área de lavado: debe incluir un lavadero grande con agua caliente y agua fría y una fuente de agua de alto grado de pureza, También debe contener basureros adecuados para el material vegetal, inorgánico y de vidrio que se deseche.

·         Área de esterilización: debe contener un espacio para la autoclave vertical u horizontal (olla de presión), también debe contener un espacio para las estufas, secadores y un lavadero de agua caliente y fría.

ÁREA DE TRANSFERENCIA: en esta área es donde se realiza el trabajo de excisión, inoculación y transferencia de los explantes a los medios de cultivo. En esta área se debe contener un alto grado de asepsia

ÁREA DE INCUBACIÓN: en este cuarto es donde se incuban los medios de cultivos. Debe tener un buen control de la temperatura, de iluminación y de la humedad

ÁREA DE RUSTICACIÓN: es un área fuera del laboratorio donde puede haber control de la cantidad de luz pero esta debe de ir de forma progresiva a los cultivos, el objetivo de esta área es endurecer las plantas producidas in vitro y que estén aptas para desarrollarse en el ambiente natural.

2.1.2 Material y equipo de laboratorio

ÁREA DE PREPARACION DE MEDIOS:

·          Material: frascos Erlenmeyer, botellas y material de vidrio o plástico.

·          Equipo: refrigerador, balanzas, potenciómetro, plancha con agitador magnético.

ÁREA DE LAVADO Y DE ESTERILIZACIÓN:

·          Material: gradillas para secado, bandeja de aluminio y de plástico, recipientes de plástico grandes.

·          Equipo: autoclave vertical u horizontal, destilador de vidrio, estufas para esterilización y secado.

ÁREA DE TRANSFERENCIA:

·          Material: instrumentos de disección, frascos con alcohol, mechero de alcohol,  mascaras, guantes, marcadores a prueba de agua, bandejas.

·          Equipo: gabinete de flujo laminar, microscopio de disección con luz incidente.

ÁREA DE INCUBACIÓN:

·          Material: termómetros de máxima y mínima, gradillas para tubos de varios tamaños.

·          Equipo: un cuarto con temperatura, iluminación y humedad relativa controladas.

ÁREA DE RUSTICACIÓN:

·          Material: macetas.

·          Equipo: macetas, suelo, cámaras de alta humedad.

portada

SEP                      SNEST                      DGEST

INSTITUTO TECNOLOGICO DE CD. ALTAMIRANO

  

PRESENTACIÓN DEL BLOG DEL ALUMNO

QUE PRESENTA: ERISAEL VILLA LÓPEZ

NUMERO DE CONTROL: 08930298

LIC. EN BIOLOGÍA

CD. ALTAMIRANO, GRO. MEXICO, FEBRERO 13 DEL 2012

UNIDAD II CULTIVO DE TEJIDOS VEGETALES

INTRODUCCIÓN

En esta unidad vamos a estudiar las bases del cultivo de tejidos vegetales, veremos sobre la nutrición de las plantas, su fisiología y aplicaremos todo en el cultivo de tejidos, vamos a cultivar explantes in vitro para que estas crezcan apropiadamente.

OBJETIVO

Conocer el laboratorio, material y equipo mínimo indispensable en la preparación de los medios de cultivo. Conocer las diferentes técnicas de esterilización y su importancia en el cultivo de tejidos vegetales. Conocer las características adecuadas para la selección, manejo del explante para la siembra, así como las condiciones de incubación.

términos de biotecnología

TÉRMINOS DE USO COMUN EN BIOTECNOLOGÍA

Ácido abscisico: Hormona vegetal que cumple importantes funciones en el crecimiento y desarrollo de las plantas, cuyo precursor es el isopentenil difosfato.

Anticodon: Secuencia de tres nucleótidos en el ARNt que se emparejan de forma complementaria con un codón específico del ARNm durante la síntesis proteica para determinar un aminoácido concreto de la cadena polipeptídica.

Autoclave: es un recipiente metálico de paredes gruesas con un cierre hermético que permite trabajar a alta presión para realizar una reacción industrial, una cocción o una esterilización con vapor de agua.

Auxina: son un grupo de fitohormonas que funcionan como reguladoras del crecimiento vegetal.

Biotecnología: es toda aplicación tecnológica que utiliza sistemas biológicos y organismos vivos o sus derivados para la creación o modificación de productos o procesos para usos específicos.

Citocinina: constituyen un grupo de hormonas vegetales que promueven la división y la diferenciación celular.

Código Genético: es un conjunto de normas por las que la información codificada en el material genético (secuencias de ADN o ARN) se traduce en proteínas en las células vivas.

Codón: secuencia de tres nucleótidos del ARNm.

Dogma central de la biología molecular: transcripción del ADN a ARN y la traducción de ARN a  proteínas.

Enzimas de restricción: es aquella que puede reconocer una secuencia característica de nucleótidos dentro de una molécula de ADN y cortar el ADN en ese punto en concreto, llamado sitio o diana de restricción, o en un sitio no muy lejano a éste, dependiendo de la enzima.

Etileno: es un compuesto químico orgánico formado por dos átomos de carbono enlazados mediante un doble enlace. Es uno de los productos químicos más importantes de la industria química. Se halla de forma natural en las plantas.

Explante: Tejido vivo separado de su órgano propio y transferido a un medio artificial de crecimiento.

Giberelina: es una fitohormona que se producen en la zona apical, frutos y semillas. Sus funciones son: Interrumpir el periodo de latencia de las semillas, haciéndolas germinar. Inducir la brotación de yemas. Promover el desarrollo de los frutos (floración). Crecimiento longitudinal del tallo.

Kilobase (Kb): Unidad de tamaño de los ácidos nucleídos, correspondiente a una longitud de 1000 nucleótidos.

Micropropagación: es el conjunto de técnicas y métodos de cultivo de tejidos utilizados para multiplicar plantas asexualmente en forma rápida, eficiente y en grandes cantidades.

Medio MS: es rico en nitrato y fue propuesto por murashige y skoog.

Plásmido: Los plásmidos son moléculas de ADN extracromosómico circular o lineal que se replican y transcriben independientes del ADN cromosómico.

Técnica de recombinación del ADN: técnica de manipulación genética que emplea la recombinación in vitro asociada a la inserción, replica y expresión del ADN recombinado dentro de células vivas.

Traducción genética: es la formación de proteínas a partir del ARNm.

Transcripción genética: es la formación del ARNm a partir del ADN.

biotecno: hello

biotecno: hello: ke ago aki :(