2.3.2  Selección de plantas madres

Elegir las mejores plantas, las mas grandes, libres de patógenos, que estén vigorosas, la rapidez en el crecimiento, la producción de callos, la resistencia a enfermedades, etc.

              2.3.3     explante

Tejido removido de un organismo y transferido apara su crecimiento a un medio artificial de nutrientes.

Para el medio de cultivo se debe elegir el explante o la parte de la planta que se va ha sembrar: semilla, raíz, hoja, yemas, tallos, óvulos y anteras, segmentos nodales.

              2.3.4   siembra del explante

Una vez que se tienen los explantes estos deben de ser desinfestado correctamente para evitar la proliferación de contaminantes biológicos (hongos, bacterias, y levaduras principalmente) los cuales afectan el crecimiento y desarrollo del explante.

               2.3.5    condiciones de incubación

·         luz: 500 lux.

·         temperatura: 18 – 25 ºC.

·         polaridad: debe de conservar la polaridad de la planta madre.

·         fase gaseosa: es el espacio de aire que se encuentra en el frasco, en este caso en el medio de cultivo el intercambio de aire con el interior debe de ser muy nulo.

·         Humedad: debe de ser 100 % dentro del frasco.

·         Sub cultivo: con el paso del tiempo los explantes pierden el poder vegetativo (multiplicación) y aumentan las mutaciones.

           2.3.6  Cambios fisiológicos del explante

En el explante como se encuentra encerrado en el frasco y no esta acostumbrado a los cambios del ambiente, cuando es sembrado en el medio ambiente no estará acostumbrado a los parámetros del medio debido a que dentro del frasco no corre aire.

·         El explante tendrá la cutícula más delgada y la epidermis estará desorganizada.

·         El parénquima será ineficiente para la fotosíntesis.

·         Los estomas no funcionaran al 100 %.

·         La planta sufrirá vitrificación y estas no serán muy viables.

·         Las raíces estarán más delgadas.

·         El color de la planta será mas claro.

·         La planta estará más inchada.

           2.3.7     trasplante al sustrato

Si se planta el explante en el campo o vivero la planta muere en 7 minutos.

Para que la planta sobreviva se debe primeramente aclimatar para que se endurezca durante 4 a 8 semanas siguiendo estos pasos.

1.    se controla la luz desde 20% hasta el 100% durante un tiempo, empezando desde el 20% hasta llegar 100% para que se acostumbre.

2.    En las primeras dos semanas el explante se riega con m.s. 25% diluido en el agua de riego.

3.    La humedad relativa se mantiene en 100 con nebulizadores esto se hace regando con partículas mas pequeñas de agua (roció de agua).

4.    Las raíces del explante se deben de cortar para que crezcan nuevamente agregándole enrraizador.